收藏查看我的收藏0有用+1已投票0細(xì)胞培養(yǎng)編輯鎖定本詞條由“科普中國”科學(xué)百科詞條編寫與應(yīng)用工作項(xiàng)目審核。細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等）,，使之生存、生長,、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法,。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù),，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)必不可少的過程,，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺　＜?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,，這是克隆技術(shù)必不可少的環(huán)節(jié),，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,，又可以借此研究細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長增殖等,。[1]中文名細(xì)胞培養(yǎng)外文名cellculture別名細(xì)胞克隆術(shù)語細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)地位生物技術(shù)中基礎(chǔ)的技術(shù)常用培養(yǎng)基無鈣,、鎂、離子溶液目錄1分類2環(huán)境及條件?環(huán)境因素?營養(yǎng)條件3設(shè)施器材4一般過程5具體步驟6注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)分類編輯動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)高速冷凍離心機(jī)在所有的細(xì)胞離體培養(yǎng)中,，困難的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),。SD大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞，Rat Aortic vascular smooth muscle cells 貨號：PC-R-18302,。上海豚鼠原代細(xì)胞分離

如果接種的細(xì)胞密度過低,，細(xì)胞之間的促生長作用很小，也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入生存環(huán)境的變化過程,。如果接種的細(xì)胞密度過大,，會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足，代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代,。2）適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度,，給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用，會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率,。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng),。3）盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵,?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3h到5h，待細(xì)胞貼壁后,，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),。3、懸浮型原代細(xì)胞1）必須保持細(xì)胞的懸浮狀態(tài),?？梢酝ㄟ^增加培養(yǎng)液的黏度來幫助細(xì)胞呈懸浮狀態(tài)，如給培養(yǎng)液中加入低濃度的透明質(zhì)酸復(fù)合物,。在有攪拌裝置的培養(yǎng)器皿內(nèi)加入培養(yǎng)液是,，以5ml為限度，否則攪拌時(shí)會(huì)產(chǎn)生氣泡對細(xì)胞造成傷害,。使用這種方式需注意勿使攪拌速度過快,，否則即可使培養(yǎng)液溢出又容易造成污染。如果培養(yǎng)液的量在5ml以下,，可以采用旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng),。給懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞換液時(shí)要注意不要吸出細(xì)胞。2）能夠進(jìn)行懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,，其生命力一般都比較旺盛,，體外分裂增殖的速度較快,，營養(yǎng)成分消耗大。黑龍江外包原代細(xì)胞服務(wù)在進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),，通常選用的細(xì)胞模型為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,。

視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理（如消化分散細(xì)胞,、分離等）后接入培養(yǎng)器皿中,，這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程,。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng)，實(shí)際上幼體組織（尤其是胚胎組織）比成年個(gè)體的組織容易培養(yǎng),，分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),，組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理,，盡快培養(yǎng),，因故不能馬上培養(yǎng)時(shí)，可將組織塊切成黃豆般大的小塊,，置4℃的培養(yǎng)液中保存,。取組織時(shí)應(yīng)嚴(yán)格保持無菌，同時(shí)也要避免接觸其他的有害物質(zhì),。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時(shí)容易帶菌,，為減少污染可用素處理。由組織并分離分散細(xì)胞的方法可參閱有關(guān)文獻(xiàn),。三,、培養(yǎng)將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),，則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,，幾個(gè)小時(shí)后組織塊可貼牢在底部，再加入培養(yǎng)基,。如系細(xì)胞培養(yǎng),，一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按要求以一定的量（以每毫升細(xì)胞數(shù)表示）接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基,。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后，立即放入培養(yǎng)箱中,，使細(xì)胞盡早進(jìn)入生長狀態(tài),。正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時(shí)間觀察一次。

作為本實(shí)用新型所述的一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板的一方案,，其中：所述底座底部固定安裝有支撐腳架,。與現(xiàn)有技術(shù)相比,，本實(shí)用新型的有益效果是：通過該一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板的設(shè)置，結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理,，通過底座,、一號培養(yǎng)板、梯形卡槽,、二號培養(yǎng)板,、梯形卡塊和固定螺絲的配合，實(shí)現(xiàn)了方便拆卸,，且連接更加穩(wěn)定,，通過橫向標(biāo)尺和縱向標(biāo)尺的配合，方便標(biāo)號對比,，提高了效率,。附圖說明為了更清楚地說明本實(shí)用新型實(shí)施方式的技術(shù)方案，下面將結(jié)合附圖和詳細(xì)實(shí)施方式對本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)說明,，顯而易見地,，下面描述中的附圖是本實(shí)用新型的一些實(shí)施方式，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下,，還可以根據(jù)這些附圖獲得其它的附圖。其中：圖1為本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)示意圖,；圖2為本實(shí)用新型側(cè)視結(jié)構(gòu)示意圖,；圖3為本實(shí)用新型培養(yǎng)皿槽結(jié)構(gòu)示意圖。圖中,；100底座,、110支撐腳架、200一號培養(yǎng)板,、210梯形凹槽,、220固定螺絲、300二哈培養(yǎng)板,、310梯形卡塊,、400培養(yǎng)皿槽、410限位槽,、420限位彈簧,、430固定桿、500縱向標(biāo)尺,、510橫向標(biāo)尺,。具體實(shí)施方式為使本實(shí)用新型的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖對本實(shí)用新型的具體實(shí)施方式做詳細(xì)的說明,。請與我方溝通該組織的取材部分,、要求、儲存及運(yùn)輸條件,，以方便原代細(xì)胞取材,，保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

尤其是上皮組織分散效果好,。與細(xì)胞上的鈣,、鎂離子結(jié)合形成螯合物后，形成的機(jī)械力可使細(xì)胞分散,。Q：細(xì)胞量太少,，長不起來怎么辦？A：有幾種辦法,，如對沒消化完的組織塊反復(fù)消化,，盡量多收集一些細(xì)胞；并且盡量傳代到小皿里,，如6孔板都可以,。若是細(xì)胞仍太少，應(yīng)耐心等待,，盡量不要傳代,，只換液。Q：細(xì)胞難以貼壁,？A：盡快使接種的細(xì)胞貼壁,，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。為了盡快促進(jìn)細(xì)胞貼壁,，可以提前1h將千分之的明膠鋪于培養(yǎng)板,。Q：原代細(xì)胞培養(yǎng)方法與細(xì)胞系不同之處在哪里？A：培養(yǎng)基一般選用RPM1640,，DMEM等,，建議能加入促生長的物質(zhì)：如胰島素、氫化可的松,、EGF等因子,。二、原代正常組織分離皮膚是人體,，但長久以來,，表皮細(xì)胞一種被認(rèn)為是難以培養(yǎng)的細(xì)胞，限制了皮膚生物學(xué)基礎(chǔ)研究的發(fā)展,。作為表皮的主要細(xì)胞,，角質(zhì)形成細(xì)胞已經(jīng)成為我們了解皮膚生物學(xué)至關(guān)重要的許多原創(chuàng)性研究的焦點(diǎn)。下面就介紹下小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞的分離和培養(yǎng),?；具^程如下圖：原代小鼠角質(zhì)細(xì)胞的分離步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果：分離出的小鼠角質(zhì)細(xì)胞常見問題解答：Q：皮膚組織作為正常組織，與組織分離主要區(qū)別在哪里,？A：首先,，皮膚組織需要用中性分離酶dispaseII將表皮分離出來；其次,，在消化時(shí),。產(chǎn)品名稱：人臍間充質(zhì)干細(xì)胞，Human Umbilical cord mesenchymal stem Cells 貨號：PC-H-18105,。上海豚鼠原代細(xì)胞分離

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,，Human Umbilical Artery Endothelial Cells。上海豚鼠原代細(xì)胞分離

在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本實(shí)用新型,，但是本實(shí)用新型還可以采用其他不同于在此描述的其它方式來實(shí)施,，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本實(shí)用新型內(nèi)涵的情況下做類似推廣，因此本實(shí)用新型不受下面公開的具體實(shí)施方式的限制,。其次,，本實(shí)用新型結(jié)合示意圖進(jìn)行詳細(xì)描述，在詳述本實(shí)用新型實(shí)施方式時(shí),，為便于說明,，表示器件結(jié)構(gòu)的剖面圖會(huì)不依一般比例作局部放大，而且所述示意圖只是示例,，其在此不應(yīng)限制本實(shí)用新型保護(hù)的范圍,。此外，在實(shí)際制作中應(yīng)包含長度,、寬度及深度的三維空間尺寸,。為使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚,，下面將結(jié)合附圖對本實(shí)用新型的實(shí)施方式作進(jìn)一步地詳細(xì)描述,。本實(shí)用新型提供如下技術(shù)方案：一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板，在使用的過程,，拆卸簡單且連接更加溫度,，且方便標(biāo)號對比，請參閱圖1,，包括底座100,、一號培養(yǎng)板200、二號培養(yǎng)板300,、培養(yǎng)皿槽400和縱向標(biāo)尺500,；請?jiān)俅螀㈤唸D1，底座100底部固定安裝有支撐腳架110，具體的,，支撐腳架110焊接在底座100的底部,，底座100用于承載一號培養(yǎng)板200和二號培養(yǎng)板300，支撐腳架110用于支撐底座100,；請?jiān)俅螀㈤唸D1,，底座100頂部固定安裝有一號培養(yǎng)板200。上海豚鼠原代細(xì)胞分離

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